Departamento de Zootecnia, Engenharia Rural e Veterinária (DZERV)
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Browsing Departamento de Zootecnia, Engenharia Rural e Veterinária (DZERV) by Author "Afonso, A. F."
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- Estudo Anatomohistopatológico da Paratuberculose em ovinos Serra da EstrelaPublication . Vitória, A.; Vala, Helena; Santos, C.; Esteves, F.; Seixas, C.; Afonso, A. F.; Ribeiro, MTFA; Amado, A.A Paratuberculose é de uma doença crónica, de difícil diagnóstico, causadora de importantes perdas económicas. Por haver suspeita da sua presença nos efectivos ovinos da região da Serra da Estrela, é fundamental estabelecer um protocolo de diagnóstico rápido, eficaz e fiável, de modo a poderem ser identificados os rebanhos portadores de casos de doença e, posteriormente, elaborar-se um plano que permita o seu controlo. Este trabalho consistiu na aplicação de métodos de diagnóstico anatomopatológicos a 34 animais previamente submetidos a dois testes serológicos, ELISA e AGID, aos quais foi realizada a necrópsia. Assim, foram contemplados vários parâmetros de diagnóstico que incluíram a observação do hábito externo antes da realização da necrópsia, necrópsia, exame histopatológico, método de coloração de Ziehl-Neelsen, bem como o método de Imunohistoquímica, cujos resultados se apresentam. Teve como objectivo o estudo anátomopatológico de uma amostragem de animais soropositivos, negativos e duvidosos, de modo a avaliar o padrão lesional macro e microscópico, a presença de bactérias álcool-ácido-resistentes na coloração de Ziehl-Neelsen, bem como a marcação com o anticorpo anti-MAP, de modo a comparar estes resultados com os da serologia e assim contribuir para o objectivo último de estabelecer um protocolo de diagnóstico rápido, eficaz. Dos trinta e quatro animais enviados para necrópsia, verificou-se que os mesmos apresentaram reacção positiva ao ELISA em dezasseis casos, duvidoso num e foi negativo em doze animais. O AGID foi positivo apenas em quatro animais, e negativa em vinte e seis animais. O exame do hábito externo foi compatível em vinte e sete animais e não compatível em seis animais. O exame macroscópico foi compatível em vinte e oito animais e foi não compatível em três animais. A histopatologia foi compatível em vinte e um animais e foi não compatível em dez animais. Na coloração de Ziehl-Neelsen observaram-se bactérias álcool-ácido resistentes em dezoito animais e não se observaram bactérias álcool-ácido resistentes em treze animais. Na imunohistoquímica dois animais foram positivos.
- Estudo anatomohistopatológico e microscópico.Publication . Vala, Helena; Afonso, A. F.; Esteves, F.; Santos, C.; Seixas, C.; Amaral, M.; Albuquerque, T.; Botelho, A.; Amado, A.Este trabalho consistiu na aplicação de métodos de diagnóstico anatomopatológicos a 46 animais previamente submetidos a dois testes serológicos, ELISA e AGID, aos quais foi realizada a necrópsia. Foram contemplados vários parâmetros de diagnóstico que incluíram a observação do hábito externo antes da realização da necrópsia, exame macroscópico, exame histopatológico, método de coloração de Ziehl-Neelsen e método de Imunohistoquímica, cujos resultados se apresentam. Teve como objectivo o estudo anátomopatológico de uma amostragem de animais soropositivos, negativos e duvidosos, de modo a avaliar o padrão lesional macro e microscópico, a presença de bactérias álcool-ácido-resistentes detectadas pelo método de coloração de Ziehl- Neelsen, bem como pela detecção imunohistoquímica com o anticorpo anti-MAP, de modo a comparar estes resultados com os da serologia e assim contribuir para o objectivo último de estabelecer um protocolo de diagnóstico rápido, eficaz. A maioria dos animais submetidos a necrópsia, apresentou um quadro de magreza e mau estado geral, seguindo-se os sinais de diarreia ou de fezes moles. Na grande maioria dos animais submetidos a necrópsia, foram evidentes lesões ganglionares, principalmente adenomegália, as quais correspondiam a lesões microscópicas de linfadenite granulomatosa, seguindo-se o pregueamento que não desaparecia quando a superfície da mucosa era esticada e que correspondia a inflamação granulomatosa difusa na mucosa e submucosa do intestino e da válvula íleo-cecal. Dos 46 animais enviados para necrópsia, 43 apresentavam resultados de serologia, tendo-se verificado que 20 (46,5%) apresentaram reacção positiva ao teste de ELISA, 2 foram duvidosos e 21 (47,7%) foram negativos. O AGID foi positivo apenas em 4 (9,3%) animais e negativo em 39 animais (90,7%). O exame do hábito externo foi compatível em 34 animais (75,6%) e não compatível em 11 animais (24,4%). O exame macroscópico foi compatível em 40 animais (93%) e foi não compatível em 3 animais (7%). O exame microscópico histopatológico foi compatível em 26 animais (60,5%) e foi não compatível em 17 animais (39,5%). No método de coloração de Ziehl-Neelsen observaram-se bactérias álcool-ácido resistentes em 20 animais (46,5%) e não se observaram bactérias álcool-ácido resistentes em 23 animais (53,5%). Na técnica de imunohistoquímica identificaram-se também 20 animais positivos (46,5%) e 23 animais (53,5%) foram negativos.
- Immunohistochemical studies of epidermal differentiation, cell proliferation and p53 mutation in bovine ocular squamous cell carcinomaPublication . Vala, Helena; Afonso, A. F.; Esteves, F.; Santos, C.; Seixas, C.; Amaral, M.; Albuquerque, T.; Botelho, A.; Amado, A.The purpose of the present study was to immunocharacterize Bovine Ocular Squamous Cell Carcinoma neoplastic cells, in terms of proliferation index and DNA damage, using two human primary antibodies anti- Ki67 antigen of the cell cycle and anti- p53. Ki67 is a nuclear antigen expressed in dividing cells during late G1, G2, S-phase and M-phase that disapears rapidly after mitosis. p53 is a tumor supressor protein that plays a key role in the control of the DNA damage acting as a supressor of tumour cell proliferation, enhancing genetic stability. Mutation of the gene that codes for p53 provides an extended intracellular half-life of the protein and greater stability, therefore increasing its expression. Tumours for this study were obtained at the slautherhouse, in Ponta Delgada, Azores. A total of thirty samples were colected from eighteen bovine. Immunohistochemical analysis was performed in parafin embeded sections of formalin fixed material, using the Avidin-Biotin-Peroxidase method (ABC). Primary antibodies used were anti-human p53 (NCL – p53 CM-1, NOVOCASTRA, UK) and anti-human Ki67 (NCL – Ki67p, NOVOCASTRA, UK), both policlonal. Positivity for both Ki67 and p53 was evaluated quantitatively and semi-quantitatively, respectively.
- Inquérito epidemiológico em explorações suspeitas de paratuberculosePublication . Pereira, I.; Santos, C.; Esteves, F.; Vala, Helena; Seixas, C.; Afonso, A. F.; Ribeiro, MTFA; Amado, A.A Paratuberculose ou doença de Johne, causada pelo Mycobacterium avium subespécie Paratuberculosis, é uma enterite crónica e incurável dos ruminantes. As perdas económicas a ela associadas e a eventual relação com a doença de Crohn em humanos justificam cada vez mais o estudo exaustivo desta doença. Este trabalho consistiu na realização de um inquérito epidemiológico em treze explorações de pequenos ruminantes da região da Serra da Estrela, com suspeita de paratuberculose, com o objectivo de caracterizar estas mesmas explorações, tendo-se focado em particular a caracterização do efectivo, o trânsito animal, as operações de maneio, e a história clínica do efectivo. Foi ainda incluído um ponto relativo à envolvente humana das explorações. Posteriormente foi efectuada a análise sumária das respostas obtidas. Do estudo realizado verificou-se que não há possibilidade de partilha de pastagens entre efectivos; a transumância é praticada em 8 das 13 explorações; Quanto aos sinais de doença observados no efectivo, 6 dos inquiridos referiram a diarreia, associada a emagrecimento progressivo. Sete dos inquiridos afirmaram não fazer o isolamento de animais suspeitos de doença; Quanto à tentativa de chegar a um diagnóstico, apenas 4 produtores afirmaram ter realizado exames complementares aos animais, tendo sido submetidos a necrópsia, e noutros 2 tendo-se efectuado provas serológicas. Relativamente à envolvente humana da exploração, verificou-se que não existiam casos de doença de Crohn, nem sinais compatíveis com a mesma, tendo no entanto 6 dos proprietários afirmado conhecer a doença.